RESUMO
Dysferlinopathies are autosomal recessive inherited muscular dystrophies caused by mutations in the gene DYSF. Dysferlin is primarily expressed in skeletal muscle, cardiac muscle, and peripheral blood monocytes. Expression in skeletal muscle and monocytes strongly correlates in healthy and disease states. We evaluated the efficiency of the monocyte assay to detect carriers and to determine the carrier frequency of dysferlinopathies in the general population. We enrolled 149 healthy volunteers and collected peripheral blood samples for protein analysis. While 18 of these individuals with protein levels in the range of 40%-64% were predicted to be carriers by the monocyte assay, subsequent DYSF sequencing analysis in 14 of 18 detected missense variants in only four. Analysis of DNA methylation patterns at the DYSF locus showed no changes in methylation levels at CpG islands and shores between samples. Our results suggest that: (1) dysferlin expression can also be regulated by factors outside of the dysferlin gene, but not related to DNA methylation; (2) carrier frequency and therefore the number of affected individuals could be higher than previously estimated; and (3) although reliable for evaluating dysferlinopathies, the monocyte assay cannot be used to determine the carrier status; for this, a molecular analysis of DYSF must be performed.
Assuntos
Doadores de Sangue , Proteínas de Membrana/genética , Monócitos/metabolismo , Proteínas Musculares/genética , Distrofia Muscular do Cíngulo dos Membros/genética , Mutação , Adulto , Idoso , Ilhas de CpG , Metilação de DNA , Análise Mutacional de DNA , Disferlina , Epigênese Genética , Feminino , Expressão Gênica , Heterozigoto , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-Idade , Músculo Esquelético/metabolismo , Distrofia Muscular do Cíngulo dos Membros/diagnóstico , Distrofia Muscular do Cíngulo dos Membros/metabolismo , Valor Preditivo dos TestesRESUMO
FUNDAMENTO: Estudiar la presencia de anticuerpos anti-GQ1b como herramienta para el diagnóstico del síndrome de Miller-Fisher (SMF). PACIENTES Y MÉTODO: Se estudiaron 54 pacientes con sospecha de SMF y 10 pacientes con diagnóstico cierto de síndrome de Guillain-Barré con oftalmoplejía (un caso), encefalitis de Bickerstaff (un caso), oftalmoplejía recidivante (7 casos) y diplopía recidivante (un caso). Los resultados se compararon con 130 pacientes con otras neuropatías disinmunes. Se realizó determinación de anticuerpos anti-GQ1b mediante ensayo enzimático de inmunoabsorción (ELISA) y posterior comprobación por cromatografía en capa fina (CCF), así como serología de Campylobacter jejuni mediante test de fijación de complemento. RESULTADOS: Se confirmó el diagnóstico de SMF en 38 pacientes. En un 97,3 por ciento de ellos se detectaron anticuerpos anti-GQ1b, siendo todos negativos para serología de Campylobacter jejuni. Ningún paciente con sintomatología aguda troncoencefálica resultó positivo. Sólo un 1,8 por ciento de pacientes con otras neuropatías presentaron anticuerpos anti-GQ1b. Un 84,2 por ciento (16/19) de enfermos a los que se les realizó una segunda determinación a las 4-5 semanas negativizaron los anticuerpos, coincidiendo además con una mejoría clínica. CONCLUSIONES: Los anticuerpos anti-GQ1b son indicadores del SMF y sirven para su diagnóstico diferencial, sobre todo con otras enfermedades agudas cerebelosas y de tronco cerebral. Su positividad depende del momento en que se realiza el estudio, por lo que se recomienda su investigación dentro de las primeras 4 semanas de curso clínico. La correlación entre la tríada de ataxia, arreflexia y oftalmoplejía y títulos positivos de anticuerpos anti-GQ1b confirma su especificidad para el diagnóstico del SMF (AU)
